Estudio genético funcional de la interacción de las cinasas GacS y LadS en Azotobacter vinelandii
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2020-12
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"En este trabajo, se generó una doble mutante gacSladS. La doble mutación ladSgacS generó una disminución considerable en la síntesis de alginato y en la expresión de rsmz1, rsmz2 y rsmY a niveles de la mutante sencilla gacS. Los resultados obtenidos nos sugieren que GacS es dominante con respecto a LadS en el sistema regulatorio, que LadS requiere la presencia de GacS para realizar su función. Indicando también una posible interacción entre ambas cinasas. Sin embargo, llevando a cabo un ensayo de doble híbrido cuantitativo confirmamos que este sistema no detecta interacción entre GacS y LadS. Como alternativa se propone un ensayo tipo pull down para interacción entre proteínas, por lo que se generó la cepa de E. coli que expresa la región citoplasmática de LadS y se evaluaron las condiciones para su correcta expresión y purificación."
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